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--纸境--:一般都是脱脂奶粉没溶解好。除了老师说的过滤,你可以 1.增加溶解时间,如果你是在孵育盒里溶解的话,你可以电转开始后就去把奶粉溶解上。 2.加大力度,先在离心管里配好用手摇,然后再倒到孵育盒里。 3.封闭时蛋白那面的膜朝下 4.换厂家,比如贵的BD的。其它可食用的脱脂奶粉,也没问题。德运的、雀巢的。 5.封闭后可以多洗一次,5min×1换成5min×2适当延长时间也可以 6.封闭后洗完换孵育盒,再加一抗 第三条稍微有点玄学的意思
橘猫的橘儿:我们实验室一直是溶解脱脂奶粉后再离心一下,把未溶解的沉淀离下来会好很多
潇潇潇潇潇菡:有时候也可能跟样本里这个靶标本身的表达丰度太低有关,曝光的时候机器采集到了非特异的黑点信号,我的靶标最初也有这个问题,提高上样量之后就好了
谦谦在干什么:课代表 原因一:用脱脂奶粉做封闭液,如果没有完全溶解,封闭液里会有小颗粒会沉淀到膜上 如果不确定有没有完全溶解,可以过滤后使用 原因二:膜污染,例如膜掉落到地上 ps: 清洗不干净一般会导致背景升高,导致黑点概率较小
破空穿云箭:是不是边敷抗体边跟别人聊天还不戴口罩把自己的蛋白显出来了[歪嘴]
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